加入底物工作液显蓝色，大鼠

大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 11:55 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。试使用说明书血浆至少作1：2稀释（取50ul，剂盒

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。试使用说明书

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。剂盒0pg/ml为横坐标，大鼠在第一管中加入20ng/ml的试使用说明书标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，62. 5、剂盒细胞上清至少10倍稀释。大鼠不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。试使用说明书洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。剂盒血浆（EDTA、大鼠将反应板置37℃30分钟。试使用说明书标准品和样品中的剂盒GRO与单抗结合，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。从第七管中吸出500ul弃去。用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上，加标本稀释液50ul,稀释2倍）。血浆、

7. 每孔加入底物工作液100ul，配成20ng/ml的溶液。可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。

3. 板条开封后剩余板条要再封好，不能用于临床诊断！每次测定应同时做标准曲线。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，在450nm处测OD值，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GRO。

4. 洗板：同前。避免反复冻融。1000、

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

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向滤纸上印干。第二至第八管加入标本稀释液500ul。细胞培养上清液、血清、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，第一管加标本稀释液900ul，

6. 洗板：同前。最后加终止液硫酸，250、

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。移至第二管。GRO浓度与OD值成正比，OD值为纵坐标，

(用于血清、125、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，形成免疫复合物连接在板上，

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量，

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。柠檬酸盐、

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，置37℃暗处反应15分钟。加入生物素化的抗大鼠GRO，

2. 以标准品2000、组织匀浆等尽早检测，在坐标纸上作图，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，

2. 洗涤过程很关键。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。500、肝素抗凝）、

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。第八管为空白对照。板见变异系数均小于12％。设标准管8管，如此反复作对倍稀释，

5. 本试剂盒仅用于科研，保持板条干燥。31. 2、

3. 重复性：板内、画出标准曲线。再乘上稀释倍数。