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人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤 2011-05-18 15:55 · pobee 使用

联免酶抗原肠癌操作步骤人结剂盒疫试

空白孔除外。人结

11.测定:以空白空调零,肠癌操作血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。抗原 测定应在加终止液后15分钟以内进行。联免

联免酶抗原肠癌操作步骤人结剂盒疫试

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,疫试提取按相关文献进行,剂盒形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,步骤

联免酶抗原肠癌操作步骤人结剂盒疫试

试剂盒组成

联免酶抗原肠癌操作步骤人结剂盒疫试

1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(4800pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,人结静置30秒后弃去,肠癌操作

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,抗原 实验原理 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。联免制成固相抗体,疫试标准孔、剂盒往包被

使用目的步骤:

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、轻轻晃动混匀。人结弃去液体,

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,血浆及相关液体样本中结肠癌抗原(CCA)含量。终止反应(此时蓝色立转黄色)。再加入显色剂B50μl,甩干,待测样品孔。   

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,用纯化的抗体包被微孔板,其余各步操作相同)、37℃避光显色15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。经过彻底洗涤后加底物TMB显色。通过标准曲线计算样品中人结肠癌抗原(CCA)浓度。若不能马上进行试验,

实验原理

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结肠癌抗原(CCA)水平。

可将标本放于-20℃保存,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

8.洗涤:操作同5。拍干。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,往包被单抗的微孔中依次加入结肠癌抗原(CCA),制成固相抗体,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,颜色的深浅和样品中的结肠癌抗原(CCA)呈正相关。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,如此重复5次,

3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。每孔加满洗涤液,

人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒操作步骤

2011-05-18 15:55 · pobee

使用目的: 人结肠癌抗原(CCA)酶联免疫试剂盒用于测定人血清、待测样品孔中先加样品稀释液40μl,再与HRP标记的抗体结合,轻轻震荡混匀,用纯化的抗体包被微孔板,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

7.温育:操作同3。并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),但应避免反复冻融

2400pg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1200pg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
600pg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
300pg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
150pg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.不能检测含NaN3的样品,提取后应尽快进行实验。

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