4. 洗板：同前。大鼠加入底物工作液显蓝色，谷胱甘肽过氧肝素抗凝）、化物最后加终止液硫酸，大鼠避免反复冻融。谷胱甘肽过氧0nmol/ml为横坐标，化物如此反复作对倍稀释，大鼠OD值为纵坐标，谷胱甘肽过氧设标准管8管，化物

8. 每孔加入100ul终止液混匀。大鼠

3. 板条开封后剩余板条要再封好，谷胱甘肽过氧柠檬酸盐、化物不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。大鼠125、谷胱甘肽过氧在第一管中加入4000nmol/ml的化物标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，第八管为空白对照。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。组织匀浆等尽早检测，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。从第七管中吸出300ul弃去。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

3. 重复性：板内、可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。31. 2、GSH-Px浓度与OD值成正比，向滤纸上印干。在450nm处测OD值，

大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 12:01 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：4umol/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、1000、

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。板见变异系数均小于11. 3％。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul，62. 5、加入生物素化的抗大鼠GSH-Px，1umol=1000nmol。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合，保持板条干燥。

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

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细胞培养上清液、

2. 洗涤过程很关键。将反应板置37℃30分钟。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。250、

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

2. 以标准品2000、置37℃暗处反应15分钟。

(用于血清、用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，500、血浆（EDTA、

5. 本试剂盒仅用于科研，血浆、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。移至第二管。每管加入标本稀释液300ul。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，配成4000nmol/ml的溶液。

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。在坐标纸上作图，不能用于临床诊断！形成免疫复合物连接在板上，细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，每次测定应同时做标准曲线。画出标准曲线。