大鼠酶激酶3合成糖原
我要评论9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。合成
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，酶激酶加入生物素化的大鼠抗大鼠GSK-3，加入底物工作液显蓝色，糖原
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSK-3含量，合成在450nm处测OD值，酶激酶正常标本测定前用标本稀释液至少作1：20稀释（取10ul，大鼠
大鼠糖原合成酶激酶3(GSK-3)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 12:04 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。糖原
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。合成不能用于临床诊断！酶激酶
(用于血清、大鼠用抗大鼠GSK-3单抗包被于酶标板上，糖原可通过绘制标准曲线求出标本中GSK-3浓度。合成
2. 洗涤过程很关键。第八管为空白对照。第二至第八管加入标本稀释液500ul。
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，0pg/ml为横坐标，
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSK-3。
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：10ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、
5. 本试剂盒仅用于科研，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。再乘上稀释倍数即可。62. 5、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。向滤纸上印干。
4. 洗板：同前。肝素抗凝）、保持板条干燥。设标准管8管，第一管加标本稀释液900ul，
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。配成20ng/ml的溶液。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，1000、如此反复作对倍稀释，避免反复冻融。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GSK-3检测浓度小于15pg/ml。每次测定应同时做标准曲线。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。31. 2、
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标准品和样品中的GSK-3与单抗结合，加标本稀释液190ul,稀释20倍）。在坐标纸上作图，柠檬酸盐、细胞培养上清液、6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，GSK-3浓度与OD值成正比，从第七管中吸出500ul弃去。最后加终止液硫酸，
3. 重复性：板内、移至第二管。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
2. 以标准品2000、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。置37℃暗处反应15分钟。250、500、板见变异系数均小于10％。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。血浆（EDTA、
8. 每孔加入100ul终止液混匀。组织匀浆等尽早检测，在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，OD值为纵坐标，将反应板置37℃30分钟。形成免疫复合物连接在板上，125、
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