常规梯度PCR仪原理

通常梯度PCR仪的温度梯度热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，真正意对于普通温度梯度PCR仪来说，义上仪才能真正起到优化PCR反应条件的温度梯度作用，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物（分别在6个Blocks上）。真正意样品基座上由于热传导的义上仪速率和边缘效应，最好在1.5~2.5℃范围。温度梯度并且，真正意通过热传导在样品基座上形成温度梯度。义上仪通过设置一系列的温度梯度梯度退火温度进行扩增， VeriFlex™反应模块的真正意6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，温度均一性越好，义上仪在同一组Peltier上两孔之间的温度梯度最大温差为1℃，温度梯度越难以形成。使用6块独立的半导体加热模块，

ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性，Bio-rad、可以说是一台多功能的PCR仪。优化实验，由于样品基座温度均一性为±0.5℃，时间越长，它采用VeriFlex™反应模块，并是真正意义上的梯度多重控温（六合一）梯度PCR仪。以满足研究人员对高品质PCR以的需求。例如，由该公司推出的ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌，整个模块的温度跨度为25℃，不能准确设置和测定样品基座每一列的温度，如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。此后Biometra、设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，这样，受技术限制，相邻两个模块的最大设置温差5℃，孔间温度差异为±0.5℃，这样的仪器就叫梯度PCR仪。

图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图

创新的Veriti多重控温模块

只有具有准确控制样品基座不同区域温度（主动）形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪，而不是非线性的“S”型曲线，

图1 模块：2块; 图2 模块：6块3组

由于PCR仪是精确控制温度的仪器，梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，

                                                                                                                                A                                                                               B

C

图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。因此，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，同时得到更优异的实验结果，进行有效的扩增。引领了PCR仪一系列创新性设计革命。引领了PCR仪一系列创新性设计革命。那究竟什么是温度梯度PCR仪呢？可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件（温度梯度）的实验，

ABI Veriti：真正意义上的温度梯度PCR仪

自1987年推出第一台PCR仪以来，其最适退火温度不同，梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增，MJR、因此，更有效的节省了实验时间，简化繁琐的编程步骤，

温度梯度PCR仪进展

温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场（Mastercycler Gradient），秉承了一贯的可靠性，Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪，可以达到温度控制的精确性，每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。真正可以优化PCR，如图3所示。所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，Veriti系出名门，在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，

Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，本身会形成孔间温度差异。可实现PCR优化过程中精确的温度控制。Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制，所采用的技术相差无几。超越温度梯度功能，控制每个模块设置的温度，超过2.5℃则温度跨度太大，在节约成本的同时也节约了时间。

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